CFDA SE Cell Proliferation and Cell Tracking Kit

細胞增殖與示蹤檢測試劑盒

產品關鍵詞：

CFDA, SE；Calcein AM鈣黃綠素；Cell Division細胞分化（分裂）；Fluorescein diacetate (FDA)；PKH26；CAS NO：150347-59-4；

產品信息

【溫馨提示】：見我司懋康生物（maokangbio）提供的CFDA SE 超純凍干粉末（# MX3009-5MG）。

產品描述

CFDA SE細胞增殖與示蹤檢測試劑盒（CFDA SE Cell Proliferation and Cell Tracking Kit）是一款基于熒光探針CFDA, SE，用于細胞增殖檢測和細胞熒光示蹤的檢測試劑盒。此方法目前廣泛替代MTT法或者³H-胸腺嘧啶核苷摻入法（³H-thymidine incorporation）等細胞增殖檢測方法。本試劑盒包含粉末形式的CFDA, SE探針，細胞培養級的溶劑，以及細胞標記液，使用方便，操作簡單。按照每個樣本的標記體積為1ml來算，我司（懋康生物）提供兩種規格的試劑盒，分別可檢測500個和1000個樣品。

CFDA, SE，英文全名5(6)-Carboxyfluorescein diacetate N-succinimidyl ester，CAS NO. 150347-59-4，是一種穩定的、細胞膜滲透性的非熒光染料，由兩個醋酸基團和一個琥珀酰亞胺酯（SE）官能團組成的一個熒光分子。一旦主動擴散進入細胞，其醋酸基團被胞內酯酶切割，生成熒光素酯CFSE。CFSE具有高度熒光，且能通過其琥珀酰亞胺酯基團共價結合到細胞內的蛋白氨基基團。正是這個共價偶聯反應，CFSE能夠極其長期的保留在細胞內，長達數個月。另外，歸因于這一穩定連接，一旦染料進入細胞，不會轉移到鄰近細胞。無活力細胞仍然是非熒光。而活細胞一旦分化，CFSE能夠很均勻的分散到子細胞中，每分裂一次子代細胞約能得到親本細胞1/2的熒光強度，因此，通過流式細胞儀對熒光強度的檢測，能夠依次分選出未分裂細胞，分裂一次的細胞（1/2熒光強度），分裂兩次的細胞（1/4熒光強度），分裂三次的細胞（1/8熒光強度），以及以此類推其他分裂次數的細胞。CFSE可以檢測分裂多達8次或更多次數的細胞增殖。

CFSE廣泛用于細胞增殖和體內細胞示蹤研究。CFSE的zui大激發和發射波長分別為492nm和517nm，標記細胞后呈綠色熒光。使用流式細胞儀檢測可用FL1檢測通道。也能用熒光顯微鏡觀察，使用FITC濾片。

產品包裝

注意事項

1）   CFDA SE溶劑在低溫（如4℃，冰?。┑葪l件下會凝固而粘在離心管底、管壁或蓋子上，可將其置于25℃溫育片刻直至全部融解后使用。

2）   CFDA SE粉末經溶劑溶劑配制成儲存液后一個月內用完，zui多不超過三個月。因CFDA SE容易被水解，并在水溶液中變質。使用過程中盡量避免接觸水。而在標記過程中接觸到水是在允許范圍內。

3）   熒光染料均存在淬滅問題，操作和儲存過程中需注意避光，以減緩熒光淬滅。

4）   為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。

使用方法【詳見懋康內容maokangbio】

1.       CFDA SE儲存液（1000X）制備

2.       CFDA SE標記液（1X）制備

3.       染色步驟

常見應用和數據示例：

根據熒光信號的稀釋來檢測細胞增殖和分化（示蹤）（Cell proliferation and cell division by Dye Dilution Method），此方法主要用來體內外檢測淋巴細胞（T細胞和B細胞）的增殖，也能用來檢測NK細胞，成纖維細胞甚至細菌。也有用來研究可移植造血干細胞的增殖。

示例1（體外）.

Fig 1. Murine CD₄⁺ lymphocytes, labelled with CDFA-SE were cultured with antigen-presenting cells with different peptides to stimulate either the memory or the memory and naïve cells. Up to five cell divisions can be observed.

示例2（體內）.

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— —Written/Edited by V. Shallan【版權歸MKBio懋康所有】

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